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生物血清离心机的使用建议

2014/8/4 14:58:05??????点击:
1、 血清必须贮存-20℃,如存放于4℃,请勿超过两周,对于某些单位一次无法用完一瓶,可在无菌条件下将其40-45分装于无菌50ml离心管中,由于血清解冻时体积会增加10%,必须预留此膨胀体积的空间,否则易发生污染或容器冻裂的情形。
 
2、 血清一般为200ml和400ml装量,因此大家建议您在使用中宜采取逐步解冻的方法解冻血清:-20℃→4℃冰箱或冷库溶解24小时→室温下全溶后再分装,一般以50 ml无菌离心管中分装40-45 ml。强烈建议您在使用过程中,必须规则地将血清摇晃均匀,小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由-20℃放置至37℃环境下解冻,因为温度改变太大,溶易造成蛋白质凝结而产生沉淀。
 
3、 血清的灭活(heat-inactivation)一般是指56℃,30分钟水浴加热已完全解冻的血清,加热过程中必须规则地摇晃均匀。此处理的目的是使血清中的补体成分(complement)去活化。但是,经过灭活处理的血清会因而造成沉淀的显著增多,且会影响血清的品质。所以,细胞培养用牛血清不做灭活处理。而诊断试剂用血清在除菌过滤前进行过灭活处理。
 
4、 在使用血清的时候,勿将血清留置于37℃太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分会因而受到破坏,影响血清的品质。
 
5、 高融合细胞培养用小牛血清和标准型细胞培养用小牛血清均需采用100纳米滤器连续三次去除支原体的无菌过滤。若在血清产品中发现悬浮物,除非必须去除,建议将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。
 
6、 血清的沉淀物
 6.1 凝絮物:其产生的原因有多种,但普遍的原因是血清中的脂蛋白(lipoprotein)变形及解冻后血清中存在的纤维蛋白(fibrin)造成,这些凝絮沉淀物不会影响血清本身的品质。除非必须减少这些沉淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后取上清液加入培养基中一起除菌过滤。
 
2 显微镜下观察“小黑点”,通常经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为是血清遭受污染,而将血清放置在37℃中欲培养此“微生物”,但37℃环境下,又会使此沉淀物增多,更会误认为微生物的增殖,但以培养细菌的培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点不会影响细胞的生长。
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